C18 色谱柱选型指南：如何为您的应用选择最佳色谱柱？

面对市场上琳琅满目的 C18 色谱柱，如何选择一款最适合您实验需求的产品，是提升分离效率和数据质量的关键。下面恒谱生将从分析物特性、实验条件和特殊应用三个维度，为您提供一套清晰、实用的 C18 色谱柱选型指南。

1. 按分析物的极性和疏水性选型

C18 色谱柱的核心是疏水作用，因此分析物的疏水性是选型的首要依据。

非极性或弱极性化合物：

选择：常规 C18 色谱柱。

理由：这类化合物与 C18 填料的疏水作用强，能获得足够的保留时间和良好的分离度。

强极性或水溶性化合物：

选择：耐 100% 水相 C18 柱（AQ 柱）。

理由：常规 C18 柱在高水相条件下容易发生疏水塌陷，导致对强极性化合物几乎无保留。AQ 柱通过特殊的键合技术解决了此问题，能提供有效的保留和分离。

2. 按分析物的酸碱性质选型

分析物的 pKa 值决定了其在不同 pH 环境下的存在状态(分子型或离子型)，这直接影响分离效果。

酸性化合物（如苯甲酸）：

选择：常规 C18 柱或宽 pH 耐受 C18 柱。

流动相：通常在酸性条件下(如 pH 2-3)进行分析，使化合物保持分子型，增强其与固定相的疏水作用。

碱性化合物（如生物碱）：

选择：宽 pH 耐受 C18 柱(推荐)或经过特殊封端处理的常规 C18 柱。

流动相：

高 pH 方案：在碱性条件下(如 pH 8-10)分析，使碱性化合物保持分子型，可获得对称峰形。这需要使用耐高 pH 的色谱柱。

低 pH 方案：在酸性条件下分析，此时碱性化合物呈离子态，保留较弱。可通过在流动相中添加离子对试剂(如庚烷磺酸钠)来增强保留，但这会增加色谱柱维护的复杂性。

3. 按分子大小选型

小分子化合物（<1000 Da）：

选择：常规孔径(如 100Å-120Å)的 C18 柱。

理由：常规孔径足以让小分子自由进出，实现高效分离。

大分子化合物（如多肽、蛋白质）：

选择：大孔径 C18 柱(如 300Å)。

理由：大分子需要更大的孔径才能进入填料内部，与 C18 基团充分作用。使用小孔径柱会导致峰拖尾严重、分离效率低下，甚至无法保留。

4. 综合选型决策树

您可以遵循以下步骤进行选择：

看分子大小：确定是小分子还是大分子? → 选择常规孔径或大孔径柱。

看水溶性：是否为强极性、水溶性强的化合物? → 是，则优先考虑 AQ 柱。

看酸碱性质：是酸性、碱性还是中性? → 碱性化合物优先考虑宽 pH 柱，以获得最佳峰形。

看实验条件：您计划使用的流动相 pH 范围是什么? → 如果需要 pH>8 或 pH<2.必须选择宽 pH 耐受柱。