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  • 高效液相色谱法检测类胡萝卜素

    高效液相色谱法检测类胡萝卜素

            一、什么是类胡萝卜素:         类胡萝卜素是自然界中广泛存在的黄色、橙红色或红色多烯物质。它们是在胡萝卜中发现的,因此得名。人体不能合成类胡萝卜素,因此主要通过食物获得。水果和蔬菜是类胡萝卜素的主要食物来源。         类胡萝卜素由8个类异戊二烯单元组成,根据分子组成可分为胡萝卜素和叶黄素两大...
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  • 为什么 HPLC 色谱柱比 GC 色谱柱短?

    为什么 HPLC 色谱柱比 GC 色谱柱短?

            HPLC和GC是已在化学实验室中站稳脚跟的分离技术。这两种技术的基本目的是分离和量化有机混合物的成分。         您有没有想过为什么HPLC色谱柱比 GC 色谱柱更短更宽。在回答这个问题之前,您应该了解柱长度的好处。         一、柱长:         随着液相色谱柱长度的增加,洗脱化合物和固定相之间的相互作用时间...
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  • 液相色谱中的过滤器和过滤作用

    液相色谱中的过滤器和过滤作用

            以“清洁”流动相将样品输送至液相分析柱对于稳健的方法和高质量的结果非常重要。过滤器与高效液相色谱 (HPLC) 仪器的正确、可靠运行有关。         过滤器和过滤的主题在 LC 中非常重要,因为如果流动相流路中存在微粒,LC 系统中的许多组件很容易过早失效。例如,从溶剂瓶中抽出的流动相中的灰尘或其他颗粒会导...
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  • 使用 HPLC 纯化绿茶中的多酚

    使用 HPLC 纯化绿茶中的多酚

            绿茶被广泛认为是地球上最健康的饮料之一。纵观历史,绿茶一直被用作治疗多种疾病的民间疗法,今天它继续被提倡作为补充和替代药物,虽然它一直备受争议。现代研究并没有消除这些长期存在的假设,而是让人们相信绿茶相关的健康益处。         绿茶的药用特性源自茶树种,广泛归因于该植物的高酚含量。使用高效液...
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  • 液相保护柱的作用

    液相保护柱的作用

              任何HPLC或UHPLC柱都是有试用寿命的。正确使用和维护色谱柱可以延长其使用寿命,有利于该方法的经济性。重要的是遵循公认的色谱惯例,如适当的样品制备(样品应通过0.45µm的膜过滤器进行高效液相色谱过滤,通过0.22µm的过滤器进行超高效液相色谱过滤);流动相的适当质量/纯度(例如,用于等度模式的等度...
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  • 液相色谱工作流程

    液相色谱工作流程

            无论正在利用何种相互作用,液相柱色谱法都分六个步骤进行: 柱平衡 样品装载 洗涤 洗脱 清洗 色谱柱再生          一、柱平衡:         大多数液相色谱方案从树脂平衡步骤开始。与目标蛋白质和所选树脂相容的缓冲液通过柱子。一种常见的做法是用 5-10 柱体积 (CV) 的平衡缓冲液平衡柱。例如,蛋白质与疏水相互...
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  • 梯度洗脱后的色谱柱重新平衡的时间

    梯度洗脱后的色谱柱重新平衡的时间

              许多用户对溶剂梯度洗脱分离后 LC 色谱柱应该重新平衡多长时间有疑问。在这里,我们展示了对于反相和 HILIC 分离而言,再平衡周期短的令人满意的结果。         LC 用户通常会提出和讨论关于在溶剂梯度洗脱分离后重新平衡 LC 色谱柱多长时间的问题。在本文中,我们根据最近对该主题的研究讨论了细节,并表明即...
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  • 高效液相色谱法提取和纯化木糖醇

    高效液相色谱法提取和纯化木糖醇

            高效液相色谱法是提取和纯化甜味剂木糖醇的可靠技术。木糖醇在食品工业中被广泛用作替代甜味剂;它的甜味与蔗糖相似,热量只有三分之二。这种五碳糖存在于许多植物中,但大多浓度较低(约 1%),因此提取和纯化成本很高。因此,迄今为止,木糖醇主要通过化学方法生产,使用催化木糖脱氢。           一、在木糖...
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  • 保持液相色谱柱柱温有助于准确性和稳定性

    保持液相色谱柱柱温有助于准确性和稳定性

            温度的变化会对色谱分析方法的重现性和色谱柱的寿命产生重大影响。但为什么会这样?恒谱生在以下的内容将会为您介绍。         一、再现性         随着温度的变化,液相色谱柱内固定相和流动相之间的热力学会受到直接影响。在不同温度下运行方法可能会影响分析物容量因子 (k) 或分析物在色谱柱上的保留时间。  ...
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  • HPLC溶剂进样口过滤器过滤流动相的重要性

    HPLC溶剂进样口过滤器过滤流动相的重要性

              缓冲液是一种含有弱酸及其共轭碱(或弱碱及其共轭酸)的水溶液。加入少量强酸或强碱后,缓冲溶液的 pH 值变化很小,当小的环境因素发生变化时,有助于抵消分析方法中的条件变化。缓冲溶液用于将 pH 值保持在几乎恒定的值。由于这种弱酸 (HA) 与其共轭碱之间存在平衡,它们对 pH 变化具有抵抗力。         一、...
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  • 高效液相色谱仪器组成

    高效液相色谱仪器组成

            HPLC 色谱仪器可以是一组单独的模块或元件,但也可以设计为单个装置。模块概念在单个组件失效的情况下更加灵活;此外,系统各个零件不必来自同一制造商。如果您不喜欢自己进行小修,您会更喜欢紧凑型仪器。然而,这并不需要比模块化套件更少的工作台空间。         一台 HPLC 仪器至少具有溶剂罐、带筛板的传输...
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  • 深入了解液相色谱柱小型化

    深入了解液相色谱柱小型化

            虽然质谱联用液相色谱已被证明是发现组学(蛋白质组学、脂质组学、代谢组学、食物组学和糖组学)领域的强大工具。组学研究经常受到样本复杂性的挑战。在处理少量样品、小体积和复杂的样品基质(生物流体和单细胞分析)时,对感兴趣的分子进行识别和量化可能特别困难。液相色谱柱小型化可以克服这些挑战。减小色...
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  • HPLC 基础知识——所有关于液相色谱的基础知识

    HPLC 基础知识——所有关于液相色谱的基础知识

            液相色谱作为最常用的色谱被广泛应用于生物、化学、食品分析等领域,hplc的种类有哪些?恒谱生带你了解!         一、液相色谱的种类 1、吸附色谱 以硅胶或氧化铝为固定相。分子与硅胶之间的弱相互作用键称为吸附,键的溶解解吸。由于洗脱液分子先于样品分子占据硅胶的活性位点,因此样品分子只有在与活性位点...
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  • C18 固定相在反相方面最常用的原因及其工作原理

    C18 固定相在反相方面最常用的原因及其工作原理

            将C18 固定相称为用的最多的化学物质之一可能更合适。在色谱柱供应商中,这一阶段的不断增长的品种肯定不少。然而,在我们深入研究手头的主题之前,这里简要回顾一下 C18 固定相是如何产生的。         一、反相色谱         随着更多科学家参与反相色谱该领域,色谱中引入了额外的分离模式,以分离和纯化许多不...
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  • 高效液相色谱及其部件介绍

    高效液相色谱及其部件介绍

            高效液相色谱(HPLC) 是一种流行且用途广泛的技术,可为复杂有机样品的成分的分离、鉴定和定量提供经济实惠的解决方案。了解各个组成部分以及每个组成部分如何有助于分析的整体可靠性非常重要。         一、高效液相色谱及其部件介绍 系统主要组成部分为: 泵 探测器 根据应用产生无限数量的其他配置。比如流动...
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  • 色谱分析里的柱层析

    色谱分析里的柱层析

            柱层析被描述为一种有用的技术,其中待分离的物质被置于装有吸附剂(固定相)的柱子的最高点上,以不同的速率通过柱子,这取决于每种物质对吸附剂的亲和力。吸附剂和溶剂或溶剂混合物,并且通常在不同时间从柱中通过时聚集在溶液中。         两种最常见的柱色谱固定相是硅胶和氧化铝,而有机溶剂被认为是最常见...
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  • HPLC保护柱的使用原理

    HPLC保护柱的使用原理

            HPLC 色谱柱是液相色谱的重要组件,因为它是负责分离基质中分析物的色谱柱。保护和保养色谱柱可确保我们不仅获得可靠的结果,还能无故障操作。我们都知道 HPLC 色谱柱的使用寿命是有限的,但是如何确保获得最长的使用寿命呢? 要回答这个问题,让我们首先看看色谱柱可能被阻塞的原因。         一、引入 HPLC 色...
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  • 使用制备液相色谱的工作流程和技巧

    使用制备液相色谱的工作流程和技巧

            本文的重点是快速液相色谱和高效液相色谱。没有一种完美的协议适合每一种分离目的。因此,建议为您的特定应用程序优化方法。通过本文中列出的建议以及一些前期阅读和测试,您将轻松纯化您正在寻找的组件。         一、快速液相色谱纯化         使用快速色谱法进行纯化的缺点是该方法固有的分辨率较低。快速液...
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  • hplc液相色谱系统准备缓冲液的技巧

    hplc液相色谱系统准备缓冲液的技巧

             液相色谱是世界各地实验室使用的流行纯化技术。如果系统设置和操作正确,它可以立即从混合物中分离出所需的化合物。学习如何使用和制备缓冲液和溶剂是能提高系统性能的重要技巧之一。准确制备和正确选择缓冲液对于在液相色谱中获得可重复的结果至关重要。           一、了解您的化合物           如果您正在寻...
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  • 质谱和液相色谱

    质谱和液相色谱

            质谱 (MS) 使研究人员能够研究许多特性,例如样品的分子量、结构、特性、数量和纯度。当与液相色谱技术相结合能成为一种强大的分析工具,能够从复杂的生物混合物(如牛奶、血清和全脂)中提取有关一系列化合物的有意义的数据,包括药物代谢物、肽和蛋白质-细胞裂解物。         一、液相色谱与质谱         在将...
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  • 选择还是不选择UHPLC

    选择还是不选择UHPLC

            UHPLC是一种专门的色谱方法,与 HPLC 相比,它运行速度更快、分辨率更好并且使用的溶剂更少。UHPLC 通过使用填充较小颗粒(通常直径小于 2 µm)的较小色谱柱来实现这一点。生物化学、细胞和分子生物学、临床医学和许多其他领域的研究人员依靠 UHPLC 从混合物中分离不同类型的分子——无论这些分子是蛋白质、肽、代...
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  • HPLC 色谱柱挑选指南

    HPLC 色谱柱挑选指南

            一、分离模式         选择色谱柱的首要任务是选择分离模式。分离分子的方法有很多,其中应用最广泛的包括反相、正相、亲水相互作用、离子交换和尺寸排阻 HPLC。还有一些不太常见但更专业的分离模式,例如使用手性固定相或流动相的特定手性色谱。         反相色谱柱通常用于非极性或弱极性有机化合物,它包含非...
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  • 维护液相色谱柱良好状态指南

    维护液相色谱柱良好状态指南

            将色谱柱保持在最佳状态将大大有助于改进和标准化您的分离操作,同时确保色谱柱的使用寿命。您可以采取以下措施来实现这一目标。         一、注意清洁。如果您从一开始就注意并定期清洁,那么色谱柱 的使用寿命会更长。清洁色谱柱所需的溶剂、酸或碱的类型取决于它们的设计和吸附剂的具体类型。虽然有些色谱柱...
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  • 超高效液相色谱—UHPLC改进大蛋白质分子的分离度

    超高效液相色谱—UHPLC改进大蛋白质分子的分离度

            首次将 UHPLC 用于小分子分离时,能得到很好的峰形,但是蛋白质峰的分离几乎没有那么好,因此通常不可能显着缩短运行时间。然而,最近对蛋白质进一步改进让UHPLC 可以提供更好的分离度和更短的运行时间。虽然 UHPLC 不能让科学家始终看到蛋白质之间的所有差异,但它可以让他们看到一些差异——例如,在大体形态、...
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