多糖分离制备纯化服务丨天然多糖提取纯化
恒谱生分析检测服务中心 · 分离制备纯化服务为您提供多糖分离制备纯化解决方案
恒谱生分析检测服务中心团队基于多年色谱分离与分析检测经验,可为药企研发团队、生物技术公司及科研机构提供多糖分离制备纯化支持。依托现有分离纯化设备平台及分析能力,服务于多糖类样品的工艺开发与结构研究需求。
服务背景
天然多糖广泛存在于中药、真菌、植物、海洋生物及微生物发酵产物中,是近年来药物研发和功能产品研究的常见方向。但在实际工作中,多糖分离纯化一直是比较难处理的环节之一。
与小分子不同,多糖通常具有结构复杂、分子量分布宽、缺乏明显紫外吸收等特点。粗提物中往往还会带有蛋白、色素、无机盐及小分子杂质,直接用于后续分析时,常见问题包括:
● 杂质干扰较大,数据重复性不稳定
● 分子量分布宽,目标组分不清晰
● 酸性与中性多糖混合,分离困难
● 批次差异明显,后续质量控制难建立
针对这些情况,我们通常会根据样品性质,选择合适的分离与纯化组合方案进行处理。
多糖分离制备纯化服务内容
1. 粗多糖预处理
在进入精细纯化前,通常需要对粗提物进行预处理,以减少杂质干扰并保护后续色谱系统。
常见处理方式包括:
● 脱脂处理(去除脂溶性杂质)
● 脱色处理(树脂或柱层析去除色素)
● 除蛋白处理(Sevag法或酶解法)
● 透析脱盐(去除小分子盐类)
● 超滤浓缩(兼顾浓缩与初步分级)
● 醇沉分级(按溶解性进行初步分段)
不同样品处理方式会有所差异,通常需要根据实际情况调整组合。
2. 多糖分级纯化(按分子量)
天然多糖往往是多组分混合体系,分级纯化的目的主要是按分子量进行拆分。
常用方法:
● 凝胶过滤层析(Sephadex / Sephacryl体系)
● 超滤分级(不同截留分子量膜)
● 醇沉分级(梯度乙醇沉淀)
实际项目中,这些方法常常会组合使用,以提高分级效果。
3. 多糖离子交换纯化(按电荷)
适用于酸性多糖、中性多糖或硫酸化多糖的分离。
常用体系:
● DEAE-Sepharose FF离子交换柱
● 梯度盐洗脱分离
● 不同电荷组分分段收集
该步骤常用于进一步细分多糖亚组分。
4. 制备液相纯化
当目标要求较高纯度,或常规层析难以达到分离效果时,可采用制备液相进行进一步纯化。
包括:
● 制备型HPLC纯化
● 半制备级分离
● 目标峰收集与富集
● 常用于结构研究或高纯组分制备。
5. 脱盐与小分子去除
在多糖提取及洗脱过程中,通常会引入一定盐分或小分子,需要进一步去除。
常用方式:
● 透析脱盐
● 超滤脱盐与浓缩
● 凝胶过滤脱盐
● 配套分析项目
可根据需求提供基础分析支持:
| 多糖技术服务项目内容 | ||
| 服务名称 | 服务内容 | 方法方案 |
| 多糖提取精制 | 对原材料进行多糖提取,脱色,脱蛋白,除杂等。 | 可依据需求 |
| 离子交换层析纯化 | 采用 DEAE 等离子交换填料对粗多糖中的中性糖和酸性糖进行分离 | 离子交换层析系统 |
| 凝胶层析纯化 | 针对不同混合多糖,采用对应的凝胶填料进行均一组分的分离纯化 | 凝胶层析系统 |
| 多糖纯度鉴定及其分子量测定 | 多糖纯度、多糖分子量、多糖分子量分布等检测 | GPC-RI-MALS 或 HPGPC |
| 多糖化学组成分析 | 总糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量和水分含量等检测 | 分光光度计法、比重法等 |
| 单糖组成分析 | 多糖中的单糖组分及含量检测 | 离子色谱法(ICS)/ 衍生化法 |
| 多糖紫外光谱分析 | 多糖中是否含有核酸和蛋白质 | 紫外可见分光光度计法 |
| 多糖红外光谱分析 | 鉴定多糖中单糖的种类、糖环构型、异头碳信息 | 傅里叶红外光谱(FT-IR) |
| 多糖键合结构分析(甲基化分析) | 获取单糖残基间糖苷键位置、连接方式和摩尔比 | 多糖甲基化分析(GC-MS) |
| 多糖核磁共振分析(单糖残基数、糖环构型、糖苷键及其构型、糖残基连接顺序、取代官能团及取代位置、化学位移归属等) | 一维核磁测试:1H-NMR、13C-NMR、DEPT 等 1D 核磁检测 二维核磁测试:COSY、HSQC、HMBC、NOESY/ROESY、TOCSY 等 2D 核磁检测 多糖核磁图谱解析:1H-NMR 谱、13C-NMR 谱、DEPT 谱、COSY、HSQC、HMBC、NOESY/ROESY、TOCSY 等谱图解析 |
核磁共振仪、谱图解析、多糖结构解析 |
| 多糖高级结构分析 | 多糖热稳定性、表面结构、微观形貌、链构象、晶体结构等特征 | 刚果红实验、扫描电镜技术、原子力显微镜技术、X 射线衍射技术、圆二色谱技术和分子模拟技术等 |
可处理样品类型
● 植物多糖(黄芪、枸杞、灵芝、茯苓等)
● 真菌多糖(香菇、虫草、云芝等)
● 海洋多糖(褐藻、岩藻多糖等)
● 微生物多糖(发酵来源多糖)
● 糖复合物(糖蛋白等)
● 其他糖类咨询客服
服务流程
咨询沟通 → 样品信息确认 → 方案建议 → 寄样 → 实验执行 → 数据与样品交付


