同样是C18,细辛中的马兜铃酸I为什么分离效果不一样?

同样是C18,细辛中的马兜铃酸I为什么分离效果不一样?

 

 

 

细辛是常用的中药材之一。在其质量控制中,马兜铃酸Ⅰ限量检查是需要关注的检测项目。2025年版《中国药典》规定,细辛中马兜铃酸Ⅰ采用高效液相色谱法测定,理论板数按马兜铃酸Ⅰ峰计算应不低于5000.

细辛

做中药材液相检测时,目标峰能够正常出峰,并不代表分离效果就一定理想。

尤其是细辛这类成分较为复杂的样品,在检测马兜铃酸Ⅰ时,除了关注目标峰能否检出,还需要看一个更关键的问题:

马兜铃酸Ⅰ与相邻杂质峰,到底有没有真正分开?

如果两个峰靠得太近,即使能够看到目标峰,也可能影响后续的定性和定量判断。

近期,恒谱生采用USHD C18-T 5 μm 120 Å、4.6 ×250 mm 色谱柱,对细辛中的马兜铃酸Ⅰ进行了实际测试。

结果显示:

● 马兜铃酸Ⅰ与相邻杂质峰分离度达到1.57

● 理论板数达到61286

● 满足本次检测需求

那么,这根C18色谱柱在实际测试中的表现如何?

1、测试条件

项目 测试条件
色谱柱 USHD C18-T 5 μm,120 Å,4.6 mm×250 mm
流动相 乙腈 / 0.05%磷酸水
流速 1.0 mL/min
柱温 30 ℃
检测器 UV
检测波长 260 nm
进样量 10 μL
仪器 Agilent 1200
工作站 ChemStation
参考标准 2025年版《中国药典—细辛》

流动相配置:

0.05%磷酸水:移取醋酸0.5mL到超纯水1000ml中,过0.22水相滤膜,超声脱气,上机测试。

乙腈:取色谱级乙腈,过0.22有机相滤膜,超声脱气,上机测试。

时间 0.05%磷酸水 乙腈
0 70 30
10 66 34
18 65 35
20 55 45
30 55 45
31 47 53
35 47 53
40 0 100

2、谱图和数据

细辛谱图1

细辛检测谱图 细辛谱图 

 

测试结论:

使用恒谱生USHD C18-T 120Å,5μm,4.6×250mm色谱柱,在该色谱柱条件下测试,C18-T将杂质和马兜铃酸1主峰分离度1.57.达到基线分离,马兜铃酸理论板数为61286.不低于5000.符合中国药典,满足检测需求。

3、为什么同样是C18.实际分离效果可能不同?

在液相方法开发或日常检测中,很多实验人员首先会按照“C18”来选择色谱柱。

但实际使用时,即使都是C18固定相,不同色谱柱在具体样品上的保留和分离表现也可能存在差异。

特别是当目标峰与杂质峰距离较近时,色谱柱的选择性和柱效就更加值得关注。

因此,遇到目标峰与杂质分离不开、分离度不足或者峰形不理想时,除了调整流动相、梯度、柱温等条件,也可以重新评估色谱柱本身。

本次细辛马兜铃酸Ⅰ测试中,USHD C18-T色谱柱获得了1.57的分离度和较高的理论板数,能够满足本次检测需求。

对于中药材等复杂样品,色谱柱选型不能只看“是不是C18”,更应该结合实际样品的分离度、理论板数和峰形进行判断。

产品信息

 未命名的设计 (3)

产品名称 USHD C18-T 色谱柱
 粒径  5um
孔径 120Å
pH 适用范围 1-11
规格 4.6×250mm
货号 P1F0B-00298

恒谱生|专注色谱分析与分离解决方案!


发布于: 2026-09-02