同样是C18,细辛中的马兜铃酸I为什么分离效果不一样?
细辛是常用的中药材之一。在其质量控制中,马兜铃酸Ⅰ限量检查是需要关注的检测项目。2025年版《中国药典》规定,细辛中马兜铃酸Ⅰ采用高效液相色谱法测定,理论板数按马兜铃酸Ⅰ峰计算应不低于5000.
做中药材液相检测时,目标峰能够正常出峰,并不代表分离效果就一定理想。
尤其是细辛这类成分较为复杂的样品,在检测马兜铃酸Ⅰ时,除了关注目标峰能否检出,还需要看一个更关键的问题:
马兜铃酸Ⅰ与相邻杂质峰,到底有没有真正分开?
如果两个峰靠得太近,即使能够看到目标峰,也可能影响后续的定性和定量判断。
近期,恒谱生采用USHD C18-T 5 μm 120 Å、4.6 ×250 mm 色谱柱,对细辛中的马兜铃酸Ⅰ进行了实际测试。
结果显示:
● 马兜铃酸Ⅰ与相邻杂质峰分离度达到1.57
● 理论板数达到61286
● 满足本次检测需求
那么,这根C18色谱柱在实际测试中的表现如何?
1、测试条件
| 项目 | 测试条件 |
| 色谱柱 | USHD C18-T 5 μm,120 Å,4.6 mm×250 mm |
| 流动相 | 乙腈 / 0.05%磷酸水 |
| 流速 | 1.0 mL/min |
| 柱温 | 30 ℃ |
| 检测器 | UV |
| 检测波长 | 260 nm |
| 进样量 | 10 μL |
| 仪器 | Agilent 1200 |
| 工作站 | ChemStation |
| 参考标准 | 2025年版《中国药典—细辛》 |
流动相配置:
0.05%磷酸水:移取醋酸0.5mL到超纯水1000ml中,过0.22水相滤膜,超声脱气,上机测试。
乙腈:取色谱级乙腈,过0.22有机相滤膜,超声脱气,上机测试。
| 时间 | 0.05%磷酸水 | 乙腈 |
| 0 | 70 | 30 |
| 10 | 66 | 34 |
| 18 | 65 | 35 |
| 20 | 55 | 45 |
| 30 | 55 | 45 |
| 31 | 47 | 53 |
| 35 | 47 | 53 |
| 40 | 0 | 100 |
2、谱图和数据
测试结论:
使用恒谱生USHD C18-T 120Å,5μm,4.6×250mm色谱柱,在该色谱柱条件下测试,C18-T将杂质和马兜铃酸1主峰分离度1.57.达到基线分离,马兜铃酸理论板数为61286.不低于5000.符合中国药典,满足检测需求。
3、为什么同样是C18.实际分离效果可能不同?
在液相方法开发或日常检测中,很多实验人员首先会按照“C18”来选择色谱柱。
但实际使用时,即使都是C18固定相,不同色谱柱在具体样品上的保留和分离表现也可能存在差异。
特别是当目标峰与杂质峰距离较近时,色谱柱的选择性和柱效就更加值得关注。
因此,遇到目标峰与杂质分离不开、分离度不足或者峰形不理想时,除了调整流动相、梯度、柱温等条件,也可以重新评估色谱柱本身。
本次细辛马兜铃酸Ⅰ测试中,USHD C18-T色谱柱获得了1.57的分离度和较高的理论板数,能够满足本次检测需求。
对于中药材等复杂样品,色谱柱选型不能只看“是不是C18”,更应该结合实际样品的分离度、理论板数和峰形进行判断。
产品信息
| 产品名称 | USHD C18-T 色谱柱 |
| 粒径 | 5um |
| 孔径 | 120Å |
| pH 适用范围 | 1-11 |
| 规格 | 4.6×250mm |
| 货号 | P1F0B-00298 |
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发布于: 2026-09-02





